Mestrilis缓冲液是一种常用的生物化学实验缓冲液,它由多种化学物质混合而成,用于调节溶液的pH值。以下是配制Mestrilis缓冲液的方法:
1. 首先,需要准备以下化学品:
- 0.2 M Tris-HCl (pH 8.0):将121.1 g Tris碱溶解在800 ml蒸馏水中,用浓盐酸调至pH 8.0。
- 0.2 M EDTA (pH 8.0):将40.2 g EDTA二钠盐溶解在500 ml蒸馏水中,用氢氧化钠调至pH 8.0。
- 0.2 M MgCl2 (pH 7.0):将36.3 g MgCl2·6H2O溶解在500 ml蒸馏水中。
- 0.2 M CaCl2 (pH 7.0):将33.9 g CaCl2溶解在500 ml蒸馏水中。
- 0.2 M KCl (pH 7.0):将14.6 g KCl溶解在500 ml蒸馏水中。
- 0.2 M NaCl (pH 7.0):将100 g NaCl溶解在500 ml蒸馏水中。
- 0.2 M Na2HPO4 (pH 7.0):将5.7 g Na2HPO4·12H2O溶解在500 ml蒸馏水中。
- 0.2 M NaH2PO4 (pH 7.0):将3.1 g NaH2PO4·12H2O溶解在500 ml蒸馏水中。
- 去离子水:根据需要调整总体积至所需的总体积。
2. 按照以下步骤进行配制:
- 将Tris-HCl、EDTA、MgCl2、CaCl2和KCl分别溶解在各自的蒸馏水中,然后按照比例混合。例如,如果需要制备1 L Mestrilis缓冲液,可以按照以下比例进行配制:
- 0.2 M Tris-HCl (pH 8.0):121.1 g Tris碱 + 800 ml蒸馏水 = 1 L
- 0.2 M EDTA (pH 8.0):40.2 g EDTA二钠盐 + 500 ml蒸馏水 = 1 L
- 0.2 M MgCl2 (pH 7.0):36.3 g MgCl2·6H2O + 500 ml蒸馏水 = 1 L
- 0.2 M CaCl2 (pH 7.0):33.9 g CaCl2 + 500 ml蒸馏水 = 1 L
- 0.2 M KCl (pH 7.0):14.6 g KCl + 500 ml蒸馏水 = 1 L
- 0.2 M NaCl (pH 7.0):100 g NaCl + 500 ml蒸馏水 = 1 L
- 0.2 M Na2HPO4 (pH 7.0):5.7 g Na2HPO4·12H2O + 500 ml蒸馏水 = 1 L
- 0.2 M NaH2PO4 (pH 7.0):3.1 g NaH2PO4·12H2O + 500 ml蒸馏水 = 1 L
- 根据需要调整总体积至所需的总体积。例如,如果需要制备1 L Mestrilis缓冲液,可以将上述各组分按比例混合在一起,并使用去离子水进行调整。
3. 将所有组分混合在一起后,将混合物转移到一个容量为所需总体积的容器中。例如,如果需要制备1 L Mestrilis缓冲液,可以将上述各组分按比例混合在一起,并使用去离子水进行调整。
4. 将混合好的缓冲液过滤掉可能存在的固体颗粒,然后将滤液倒入一个容量为所需总体积的容器中。例如,如果需要制备1 L Mestrilis缓冲液,可以将上述各组分按比例混合在一起,并使用去离子水进行调整。
5. 将过滤后的缓冲液置于室温下静置约1小时,让其中的气体充分逸出。
6. 使用去离子水对缓冲液进行稀释,直到其浓度达到所需的浓度。例如,如果需要制备1 L Mestrilis缓冲液,可以将上述各组分按比例混合在一起,并使用去离子水进行调整。
7. 将稀释后的缓冲液转移到一个容量为所需总体积的容器中。例如,如果需要制备1 L Mestrilis缓冲液,可以将上述各组分按比例混合在一起,并使用去离子水进行调整。
8. 如果需要进一步纯化缓冲液,可以进行透析或者超滤等操作。例如,可以使用透析袋或者超滤膜对缓冲液进行透析或超滤处理,以去除其中的杂质。
9. 最后,将制备好的Mestrilis缓冲液分装到各个试管或瓶子中,密封保存于4°C条件下。例如,可以将制备好的Mestrilis缓冲液分装到各个试管或瓶子中,密封保存于4°C条件下。
总之,通过以上步骤,就可以成功配制出所需的Mestrilis缓冲液。在使用前,需要对缓冲液进行适当的稀释和调整,以确保其适用于特定的实验条件。